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酶联免疫吸附实验(ELISA)

竞争法ELISA操作视频

本视频为Elabscience®公司ELISA试剂盒(竞争法)的操作指南,对每一步的反应都做了演示,以便实验者能更好地理解ELISA实验的过程。

竞争法原理:

用抗原包被于酶标板上,同时加入生物素化特异性抗体和样本(标准品),实验时样品或标准品中的抗原会与包被的抗原竞争结合生物素化特异性抗体。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,游离的成分被洗去。结合在包被抗原上的生物素化特异性抗体以及亲和素形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中抗原的浓度。

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