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EdU法如何检测细胞增殖-EdU试剂盒

2022-12-20作者:admin赞:0

细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。细胞增殖过程中,会发生DNA复制,此时可通过检测DNA的合成情况,来判定细胞增殖情况。常见用于细胞增殖检测方法就有EdU检测法。


很多同学之前做细胞增殖检测时,接触过同类型的BrdU检测,但对在BrdU检测之后出现的EdU检测法,缺乏一定的了解。本篇文章将带大家重点学习EdU法如何检测细胞增殖


01.BrdU法

BrdU(Bromo-deoxyuridine)法,是在DNA复制过程中,由BrdU代替胸腺嘧啶核苷结合至DNA链,再通过带有标记的BrdU抗体,与DNA链上的BrdU发生抗原抗体反应,通过检测BrdU上的标记信号判断细胞增殖状态的方法。


BrdU法的检测原理

02 EdU法

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),是胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,在DNA合成过程中,它可替代胸腺嘧啶脱氧核苷,掺入到新合成的DNA中。


EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如FITC Azide、Elab Fluor®系列染料等),在一价铜离子的催化下,形成稳定的三唑环。该反应非常迅速,因此被称作点击反应(Click reaction)。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,此时,可以使用荧光检测设备,检测细胞增殖状况。

EdU法

相较于BrdU法,EdU法具有明显的优势:

由于存在空间位阻,BrdU法的大分子抗体很难与DNA链上的BrdU结合。为了使大分子的BrdU抗体与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等)。这种变性可能会影响细胞形态,并影响后续的细胞染色与检测。而EdU法使用的是小分子叠氮化物,空间位阻小,无需对DNA进行变性处理

EdU法无需使用抗体,操作便捷,检测灵敏度高,目前正逐步取代BrdU法,现已被广泛应用于细胞增殖检测。


03 EdU试剂盒优势

反应迅速:无需抗原抗体反应,EdU结合更容易,仅需2.5小时即可完成检测

检测灵敏:单个增殖细胞也能准确检测,检测更灵敏

快捷简便:试剂盒配套全面,使用方便快捷

结果准确:无需DNA变性(酸解、热解、酶解等,)可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整

兼容性强:可与多种抗体或荧光蛋白同时标记,同时检测细胞其他性状特征


04 E-Click-EdU实验结果展示

E-CK-A376检测结果


E-CK-A376检测结果

Hela细胞用10 μM的EdU处理2h,增殖细胞(绿色),细胞用DAPI(蓝色)复染



E-CK-A373检测结果

Jurkat细胞用10 μM的EdU处理4h(绿色),不加EdU处理4h(蓝色)


05 EdU试剂盒产品列表

货号 名称 规格
E-CK-A371 E-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒(绿色,Elab Fluor® 488) 50 Assays|200 Assays
E-CK-A373 E-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒(红色,Elab Fluor® 647) 50 Assays|200 Assays
E-CK-A376 E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(绿色,Elab Fluor® 488) 50~500 Assays|200~2000 Assays
E-CK-A377 E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(红色,Elab Fluor® 594) 50~500 Assays|200~2000 Assays
E-CK-A378 E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(红色,Elab Fluor® 647) 50~500 Assays|200~2000 Assays



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