细胞增殖/毒性/活力检测
细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段，一般通过分析分裂中的细胞数量的变化，进而反映细胞的生长状态及活性。细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标，细胞活性的检测属于间接检测细胞增殖能力的方法。细胞毒性检测可以通过一系列指标的变化来进行测定，包括细胞活力、细胞增殖、线粒体功能、磷脂沉积/脂质变性、DNA 损伤、细胞周期。
Elabscience®可提供细胞增殖/毒性/活性检测方法有：EdU、Calcein AM/PI、CCK-8检测及LDH检测，基于您实验中的样本类型及检测目的，可选择符合您要求的细胞增殖与细胞毒性/活力检测试剂盒。
EdU检测展开 ↓收起 ↑
公认的最精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA合成，最初广泛使用的方法是放射性标记核苷掺入法，但该方法由于有放射性污染并且很难实现单细胞检测而受到很大的限制，随后逐渐被基于抗体检测的BrdU法所替代。BrdU法步骤繁多，且需要使用BrdU抗体，影响因素较多稳定性比较差。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应，无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高，是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法。
EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）掺入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与荧光染料标记的叠氮化物发生点击反应（Click reaction）快速检测细胞DNA复制活性，可快速准确的检测细胞的增殖能力。
EdU检测优势
- 简单 ：无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法简单高效
- 灵敏：无需抗体，检测染料仅BrdU抗体的1/500，很容易扩散，即便是单个增殖细胞也能准确检测
- 快速 ：无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，仅需2.5小时即可完成检测
- 准确 ：无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整
- 兼容 ：对样品几乎无损伤，更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征
Elabscience® EdU产品列表
| 货号 | 产品名称 | 荧光 |
|---|---|---|
| E-CK-A370 | E-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒（绿色，FITC） | FITC |
| E-CK-A371 | E-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒（绿色，Elab Fluor® 488） | Elab Fluor® 488 |
| E-CK-A373 | E-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒（红色，Elab Fluor® 647） | Elab Fluor® 647 |
| E-CK-A375 | E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒（绿色，FITC） | FITC |
| E-CK-A376 | E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒（绿色，Elab Fluor® 488） | Elab Fluor® 488 |
| E-CK-A377 | E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒（红色，Elab Fluor® 594） | Elab Fluor® 594 |
| E-CK-A378 | E-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒（红色，Elab Fluor® 647） | Elab Fluor® 647 |
EdU产品结果展示
E-CK-A371检测结果
Jurkat细胞用10 μM的EdU处理4 h（红色），不加EdU处理4 h（蓝色）
E-CK-A376检测结果
Hela细胞用10 μM的EdU处理2个小时，增殖细胞（绿色），细胞用DAPI（蓝色）复染
Calcein AM/PI检测展开 ↓收起 ↑
Elabscience® Calcein-AM/PI Double Staining Kit是一款通过Calcein-AM荧光探针标记活细胞，可以简单、快速、灵敏、准确地检测细胞活性、细胞毒性的试剂盒。
Calcein AM是在Calcein上添加上乙酰甲氧基甲酯即AM，AM为不带电荷的亲酯类化合物，易于透过活细胞的细胞膜进入胞质内，在胞质内可被非特异性酯酶水解，释放出游离酸形式的绿色荧光探针Calcein（Ex/Em= 490nm/515nm），不易漏出胞外，因此Calcein AM可对活细胞进行标记染色。PI Solution可以通过死细胞的无序区域进入细胞内，到达细胞核，嵌入DNA双螺旋从而产生红色的荧光（Ex/Em= 535nm/617nm），从而对死细胞进行标记。
Elabscience® Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒优势
- 应用广泛：兼顾悬浮细胞和贴壁细胞，可以用流式细胞仪和荧光显微镜进行检测
- 操作简单：不需要花时间进行浓度摸索，15~30min即可完成实验
- 安全性好：毒性很小，不影响细胞的分化和增殖
- 性价比高：组分齐全，buffer含有防止Calcein的荧光溢漏的成分
Elabscience® Calcein AM相关产品列表
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|
| E-CK-A354 | Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒 | 100/500/2000 Assays |
| E-CK-A164 | Calcein AM Solution(100 µM) | 100 T/500 T/500 T*10 |
| E-CK-A165 | PI Solution(750 µM) | 100 T/500 T/500 T*10 |
| E-CK-A153 | Calcein AM Assay Buffer | 100 mL |
结果对比
图1：Jurkat细胞4℃静置20天后，E-CK-A354染色流式实验结果展示
图2：不同细胞用5μM喜树碱处理4 h后，E-CK-A354染色结果展示
CCK-8检测展开 ↓收起 ↑
Cell Counting Kit-8，简称CCK-8试剂盒或CCK8试剂盒，是一种基于WST-8而广泛应用于细胞活性和细胞毒性检测的快速、高灵敏度试剂盒。
WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子载体存在下，WST-8可被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的橙黄色甲臜（Formazan）产物，产生的甲臜的量与活细胞的数量成正比，细胞增殖越多越快，颜色越深，通过检测在450 nm处的吸光度，可以间接计算活细胞的量。
由于CCK-8溶液非常稳定并且几乎没有细胞毒性，因此可以进行更长的孵育，例如24~48小时。CCK-8试剂盒的检测灵敏度高于任何其他四唑盐，如MTT、XTT或MTS。
Elabscience® CCK-8试剂盒优势
- 结果准确，重现性好 ：试剂不影响细胞活力，显色产物直接溶解于培养液，直接测定 OD 值即可准确反应细胞活力
- 灵敏度高：灵敏度高于MTT、XTT等方法，同等用量下的灵敏度为传统CCK-8试剂的3~5倍。
- 操作省时简单 ：试剂即开即用，无需配制；只需一步操作，即可测定。
- 安全性好 ：不含放射性同位素和有害有机溶剂，使用安全。
CCK-8产品结果展示
LDH检测展开 ↓收起 ↑
乳酸脱氢酶 （LDH）在胞浆内含量丰富，存在于所有类型的细胞中，并在细胞受损伤或死亡时迅速释放到细胞外。释放出的LDH 在培养基上清中，可通过酶反应来检测。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到细胞培养液中LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。
LDH催化乳酸和NAD+反应产生丙酮酸和NADH，NADH在PMS作用下，将电子传递给WST-8，产生黄色的产物，其在450 nm有特征吸收峰，从而可以通过比色法来定量乳酸脱氢酶的活性。
Elabscience® LDH细胞毒性检测试剂盒优势
- 简单直接：检测结果直接反映细胞的死亡率（吸光度越高，细胞毒性越强）
- 高灵敏度：与其他产品相比，检测同一样本，OD值更高
- 快速省时：反应时间更短，只需10 min
- 应用广泛：450 nm酶标仪检测，使用更广泛
Elabscience® LDH细胞毒性检测试剂盒
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
|---|---|---|
| E-BC-K771-M | 乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性比色法测试盒 | 96T |
结果对比
与其他产品相比，检测同一样本，灵敏度更高
反应时间更短，只需10 min
