2-step plus Poly-HRP Anti Mouse/Rabbit IgG Detection System (with DAB solution)

产品简介

Elabscience公司最新推出的二步法免疫组化试剂盒，将二抗的单价 Fab 片段和过氧化物酶HRP聚合在一起，替代传统方法中的二抗和三抗，直接放大抗原抗体结合的信号，既保留了抗体特异性结合抗原的能力，又可有效地避免聚合分子过大而 造成的空间位阻。与传统的 SP 三步法相比，此试剂盒具有简单、快速、敏感等特点，试剂盒不再使用生物素，避免了由于内源性生物素所造成的背景染色。本产品可用于检测一抗是Rabbit和Mouse来源的单克隆抗体或多克隆抗体。

附带的DAB显色液自带稀释液，避免由于各地方水酸碱度的不同对 DAB 显色所造成的影响。

产品组成 

使用说明

1. 脱蜡、水化组织切片。 

2. 根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。

3. 滴加E-IR-R217C(3% H₂O₂)，室温10分钟以灭活内源性酶。PBS清洗，3分钟×3次。 

4. 滴加E-IR-R217A(正常山羊血清），37°C封闭30分钟。甩去多余液体。 

5. 滴加适当稀释的一抗（兔或小鼠 IgG），20~37°C 1~2小时或4°C过夜。PBS洗3分钟×3次，吸水纸擦干切片。 

6. 滴加E-IR-R217B( Polyperoxidase-anti-Mouse/Rabbit IgG)，37°C孵育30分钟，PBS或TBS冲洗，3分钟×3次。 

7. 每1 mL E-IR-R217E（DAB底物液）中，加入1滴（约50 μL）的E-IR-R217D (DAB浓缩液)。混合均匀，即配成DAB工作液。此溶液必须现配现用，配好后避光保存。4小时内使用，剩余的液体舍弃。

8. 控制好DAB显色时间，阳性信号为棕黄色或褐黄色，切勿显色过深。

9. 蒸馏水冲洗切片终止显色后复染、脱水、透明、封片。 

保存条件  

2~8°C避光保存，不得冻存，有效期12个月。开封使用后，请在6个月内用完。