5× SDS Loading Buffer

产品简介

本制品是蛋白质样品进行SDS-PAGE电泳用的上样Buffer。制品中含有的SDS可与蛋白质结合成SDS-蛋白质复合物，使其带上大量的负电荷，消除蛋白质本身的电荷差异；SDS可断开分子内和分子间氢键，破坏蛋白质二、三级结构。制品中含有的DTT能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂，破坏蛋白质的结构，消除蛋白质结构之间的差异。最终，蛋白质的迁移速度只与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，以确定电泳的进行情况。

产品组成

产品使用说明

1.  室温或水浴溶解5 × SDS上样缓冲液后，室温放置。

2.  按照每20 µL蛋白质样品，加入5 µL的5 × SDS上样缓冲液，混合均匀。

3.  95~100°C加热10 min，充分变性蛋白质。

4.  12,000 rpm离心2 min，收取上清。

5.  取10~20 µL上清加至SDS-PAGE凝胶加样孔中。

5×储存液成分

0.25 M TrisHCl（pH6.8），0.5 M DTT，10％ SDS，0.5％ 溴酚蓝，50％ 甘油。

保存条件

-20°C 保存，保质期12个月。

注意事项

1. 本制品-20°C 保存时，可能会出现SDS沉淀，请于温水中溶解后使用。请按使用情况适当分装保存。

2. 样品煮沸后，若仍有比较粘稠或粘稠状的半透明物体，可适当延长煮沸时间或加入1×SDS上样缓冲液后再次煮沸，使结合在基因组DNA上的蛋白质充分释放，并使基因组DNA部分断裂，减少样本粘稠度的产生。

3. 本制品含有DTT，具有轻微刺激性气味，有一定的毒性。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。