Human ET-1(Endothelin 1) ELISA Kit

产品货号:E-EL-H0064c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-EL-H0064c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性:

检测范围: 1.25~80 pg/mL

灵敏度: 0.75 pg/mL

  • 详情
  • 文献(2)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测人Serum, plasma and other biological fluids中天然及部分重组ET-1浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ET-1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人ET-1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ET-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ET-1抗体与结合在包被抗体上的人ET-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ET-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中ET-1的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性
    检测方法 Colormetric
    检测范围 1.25—80 pg/mL
    灵敏度 0.75 pg/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 Serum, plasma and other biological fluids

    特异性

    可检测样本中的人ET-1,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (pg/mL) O.D Average Corrected
    80 2.445
    2.501
    2.473 2.394
    40 1.632
    1.638
    1.635 1.556
    20 0.902
    0.896
    0.899 0.82
    10 0.466
    0.492
    0.479 0.4
    5 0.273
    0.243
    0.258 0.179
    2.5 0.185
    0.173
    0.179 0.1
    1.25 0.121
    0.139
    0.13 0.051
    0 0.076
    0.082
    0.079 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (pg/mL)
    4.00 7.80 33.60 4.00 7.70 36.30
    Standard
    deviation
    0.30 0.40 1.40 0.20 0.30 1.40
    C V (%) 7.50 5.13 4.17 5.00 3.90 3.86

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 92-103 97
    EDTA plasma (n=5) 89-104 96
    Cell culture media (n=5) 86-100 92

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 89-104 86-97 93-110
    Average (%) 95 91 100
    1:4 Range (%) 95-110 87-97 92-104
    Average (%) 101 92 99
    1:8 Range (%) 95-105 84-95 96-111
    Average (%) 100 89 103
    1:16 Range (%) 99-115 82-93 96-109
    Average (%) 105 88 102

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1.对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟
    2.弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟
    3.弃掉板内液体,洗板3次
    4.每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    5.每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    6.每孔加入50μL终止液
    7.立即在450nm波长下读数,处理数据
    如有任何问题,请拨打电话 027-87879180 或填写 在线留言 我们会第一时间联系您。