Human/Monkey/Mouse E2(Estradiol) ELISA Kit

产品货号:E-EL-0150c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥1800 / ¥1250

货号:E-EL-0150c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 人/猴/小鼠

检测范围: 9.37~600 pg/mL

灵敏度: 5.63 pg/mL

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  • 文献(16)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测人/猴/小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组E2浓度。

    检测原理

    本试剂盒采用竞争ELISA法。用E2抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的E2与包被的E2竞争生物素标记的抗E2单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,E2浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中E2的浓度。

    反应类型 竞争法
    规格 96T
    反应时间 2.0h
    反应性 人/猴/小鼠
    检测方法 比色法
    检测范围 9.37-600 pg/mL
    灵敏度 5.63 pg/mL
    样本体积 50μL
    样本类型 Serum, plasma, saliva and urine

    特异性

    可检测样本中的人/猴/小鼠E2,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (pg/mL) O.D Average
    600 0.196
    0.238
    0.217
    300 0.284
    0.328
    0.306
    150 0.438
    0.382
    0.41
    75 0.648
    0.586
    0.617
    37.5 0.951
    0.903
    0.927
    18.75 1.361
    1.359
    1.36
    9.37 1.587
    1.701
    1.644
    0 2.413
    2.183
    2.298

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (pg/mL)
    20.55 100.44 548.02 22.84 105.23 545.22
    Standard
    deviation
    1.71 6.57 28.88 2.11 8.39 44.87
    C V (%) 8.33 6.55 5.27 9.27 7.98 8.23

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 80-95 84
    EDTA plasma (n=5) 82-98 87
    Urine (n=5) 85-112 95

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

        Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Urine (n=5)
    1:2 Range (%) 83-91 88-102 85-108
    Average (%) 85 90 93
    1:4 Range (%) 80-96 87-95 80-112
    Average (%) 89 89 92
    1:8 Range (%) 89-101 84-89 83-96
    Average (%) 92 86 87
    1:16 Range (%) 87-105 87-115 84-96
    Average (%) 91 98 88

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4.吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. 文献: Wu Y P , Ma C S , Zhao H H , et al. Alleviation of endoplasmic reticulum stress protects against cisplatin-induced ovarian damage[J]. Acta Biomaterialia, 2019. Reproductive Biology and Endocrinology, 2018, 16(1): 85-96.
      样品类型: Serum
    2. 文献: Song S , Tan Y . Expression of FKBP52 in the ovaries of PCOS rats[J]. International Journal of Molecular Medicine, 2018.
      样品类型: Serum
    3. 文献: Ying-Yan F , Peng Z , Na Q , et al. Evidence of altered depression and dementia-related proteins in the brains of young rats after ovariectomy[J]. Journal of Neurochemistry, 2018.
      样品类型: Plasma
    4. 文献: Fang Y Y, Zeng P, Qu N, et al. Evidence of altered depression and dementia‐related proteins in the brains of young rats after ovariectomy[J]. Journal of Neurochemistry, 2018.
      样品类型: Serum
    5. 文献: Yang C, Ye J, Liu Y, et al. Methylation pattern variation between goats and rats during the onset of puberty[J]. Reproduction in Domestic Animals, 2018.
    6. 文献: Kong L H, Wang Q E, Jin J W, et al. Insulin Resistance Enhances The Mitogen-Activated Protein Kinase Signaling Pathway In Ovarian Granulosa Cells[J]. Plos One, 2017.
      样品类型: Cell culture supernatant
    7. 文献: Aahmad S N S, Nourollahi S, Kazerouni F, et al. Investigation Of The Relation Between Bone Mass Density And Serum Preptin Levels In Pre-And Postmenopausal Women[J]. Journal of Bone And Mineral Metabolism, 2017.
      样品类型: Serum
    8. 文献: Zheng Q, Li Y L, Zhang D D, et al. ANP Promotes Proliferation And Inhibits Apoptosis Of Ovarian Granulosa Cells By NPRA/PGRMC1/EGFR Complex And Improves Ovary Functions Of PCOS Rats[J]. Cell Death & Disease, 2017.
      样品类型: Serum
    9. 文献: Mu Y, Yan W, Yin T, et al. Diet-Induced Obesity Impairs Spermatogenesis: A Potential Role For Autophagy[J]. Scientific Reports, 2017.
      样品类型: Serum
    10. 文献: Cui X R, Long C L, Tian J, et al. Protective Effects Of Fluvastatin On Reproductive Function In Obese Male Rats Induced By High-Fat Diet Through Enhanced Signaling Of mTOR[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2017, 41: 598-608.
      样品类型: Serum
    11. 文献: Li J, Chang J, Li W, et al. Disruption Of Sex-Hormone Levels And Steroidogenic-Related Gene Expression On Mongolia Racerunner (Eremias Argus) After Exposure To Triadimefon And Its Enantiomers[J]. Chemosphere, 2017, 171: 554-563.
      样品类型: Plasma
    12. 文献: Mu Y, Yan W J, Yin T L, et al. Curcumin Ameliorates HighFat DietInduced Spermatogenesis Dysfunction[J]. Molecular Medicine Reports, 2016, 14(4): 3588-3594.
      样品类型: Serum
    13. 文献: Yang M, Yan W J, Yin T L, et al. Curcumin Ameliorates High-Fat Diet-Induced Spermatogenesis Dysfunction[J]. Molecular Medicine Reports, 2016, 14(4): 3588-3594.
      样品类型: Serum
    14. 文献: Zheng X, Wu G, Nie Y, et al. Electroacupuncture At The Governor Vessel And Bladder Meridian Acupoints Improves Postmenopausal Osteoporosis Through Osteoprotegerin/RANKL/RANK And Wnt/β-Catenin Signaling Pathways[J]. Experimental & Therapeutic Medicine, 2015, 10: 541-548.
      样品类型: Serum
    15. 文献: Yan W J, Mu Y, Yu N, et al. Protective Effects Of Metformin On Reproductive Function In Obese Male Rats Induced By High-Fat Diet[J]. Journal of Assisted Reproduction & Genetics, 2015, 32(7): 1097-1104.
      样品类型: Serum
    16. 文献: Sun W, Wang Y Q, Yan Q, et al. Effects Of Er-Zhi-Wan On Microarchitecture And Regulation Of Wnt/β-Catenin Signaling Pathway In Alveolar Bone Of Ovariectomized Rats[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology-Medical Sciences, 2014, 34(1): 114-119.
      样品类型: Serum
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