NA/NE(Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit

产品货号:E-EL-0047c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-EL-0047c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 通用

检测范围: 0.31~20 ng/mL

灵敏度: 0.19 ng/mL

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  • 文献(9)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组NA/NE浓度。

    检测原理

    本试剂盒采用竞争ELISA法。用NA/NE抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的NA/NE与包被的NA/NE竞争生物素标记的抗NA/NE单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,NA/NE浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中NA/NE的浓度。

    反应类型 竞争法
    规格 96T
    反应时间 2.0h
    反应性 通用
    检测方法 Colormetric
    检测范围 0.31-20 ng/mL
    灵敏度 0.19 ng/mL
    样本体积 50μL
    样本类型 血清、血浆或其他相关生物液体

    特异性

    可检测样本中的NA/NE,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average
    20 0.32
    0.342
    0.331
    10 0.444
    0.45
    0.447
    5 0.654
    0.648
    0.651
    2.5 0.956
    0.958
    0.957
    1.25 1.339
    1.309
    1.324
    0.63 1.66
    1.658
    1.659
    0.31 1.9
    1.914
    1.907
    0 2.196
    2.21
    2.203

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    1.10 2.30 9.50 1.00 2.40 9.60
    Standard
    deviation
    0.10 0.10 0.30 0.10 0.10 0.40
    C V (%) 9.09 4.35 3.16 10.00 4.17 4.17

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 88-99 93
    EDTA plasma (n=5) 94-110 102
    Cell culture media (n=5) 89-102 97

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 99-112 99-114
    Average (%) 96 105 106
    1:4 Range (%) 87-102 90-101 95-111
    Average (%) 94 96 102
    1:8 Range (%) 86-99 90-103 96-110
    Average (%) 92 97 102
    1:16 Range (%) 92-107 86-98 97-112
    Average (%) 97 93 104

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4.吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. 文献: Zhang B, Li X, Chen C, et al. Renal Denervation Effects on Myocardial Fibrosis and Ventricular Arrhythmias in Rats with Ischemic Cardiomyopathy.[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2018, 46(6):2471-2479.
    2. 文献: Yu X, He W, Qin Z, et al. Selective ablation of the ligament of Marshall attenuates atrial electrical remodeling in a short‐term rapid atrial pacing canine model[J]. Journal of cardiovascular electrophysiology, 2018.
      样品类型: Serum
    3. 文献: Lü Y F, Yang Y, Li C L, et al. The Locus Coeruleus-Norepinephrine System Mediates Empathy For Pain Through Selective Up-Regulation Of P2X3 Receptor In Dorsal Root Ganglia In Rats[J]. Frontiers in Neural Circuits, 2017.
      样品类型: Serum
    4. 文献: Yu L L, Li X F, Huang B, et al. Atrial Fibrillation In Acute Obstructive Sleep Apnea: Autonomic Nervous Mechanism And Modulation[J]. Journal of the American Heart Association, 2017.
      样品类型: Plasma
    5. 文献: Lu W, Kang J, Hu K, et al. The Role Of The Nox4-Derived ROS-Mediated RhoA/Rho Kinase Pathway In Rat Hypertension Induced By Chronic Intermittent Hypoxia[J]. Sleep and Breathing, 2017.
      样品类型: Serum,Tissue homogenate
    6. 文献: Li D, Wang Q, Zhang Y, et al. A Novel Swine Model Of Spontaneous Hypertension With Sympathetic Hyperactivity Responds Well To Renal Denervation[J]. American Journal of Hypertension, 2016, 29(1): 63-72.
      样品类型: Plasma,Urine
    7. 文献: Wang K, Lu D, Zhang B, et al. Renal Denervation Attenuates Multi-Organ Fibrosis And Improves Vascular Remodeling In Rats With Transverse Aortic Constriction Induced Cardiomyopathy.[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2016, 40: 465-476.
      样品类型: Plasma,Tissue homogenate
    8. 文献: He J L, Zhao M, Xia J J, et al. FGF21 Ameliorates The Neurocontrol Of Blood Pressure In The High Fructose-Drinking Rats[J]. Scientific Reports, 2016.
      样品类型: Serum
    9. 文献: Tang C L, Huang X, Kang F, et al. Intranasal Dexmedetomidine On Stress Hormones, Inflammatory Markers, And Postoperative Analgesia After Functional Endoscopic Sinus Surgery[J]. Mediators Of Inflammation, 2015.
      样品类型: Serum
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