Pg(Progesterone) ELISA Kit

产品货号:E-EL-0154c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2000 / ¥1400

货号:E-EL-0154c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 通用

检测范围: 0.31~20 ng/mL

灵敏度: 0.15 ng/mL

  • 详情
  • 文献(6)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组Pg浓度。

    检测原理

    本试剂盒采用竞争ELISA法。用Pg抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的Pg与包被的Pg竞争生物素标记的抗Pg单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Pg浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中Pg的浓度。

    反应类型 竞争法
    规格 96T
    反应时间 2.0h
    反应性 通用
    检测方法 比色法
    检测范围 0.31-20 ng/mL
    灵敏度 0.15 ng/mL
    样本体积 50μL
    样本类型 Serum, plasma, saliva and urine

    特异性

    可检测样本中的Pg,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average
    20 0.099
    0.083
    0.091
    10 0.153
    0.131
    0.142
    5 0.364
    0.266
    0.315
    2.5 0.415
    0.869
    0.642
    1.25 0.908
    0.926
    0.917
    0.62 1.451
    1.469
    1.46
    0.31 2.097
    2.191
    2.144
    0 2.995
    2.801
    2.898

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    0.56 2.22 8.78 0.54 2.01 8.55
    Standard
    deviation
    0.05 0.14 0.53 0.05 0.14 0.53
    C V (%) 8.39 6.42 5.98 9.35 7.04 6.21

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 80-94 84
    EDTA plasma (n=5) 82-96 87
    Urine (n=5) 85-109 95

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

        Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Urine (n=5)
    1:2 Range (%) 83-90 83-102 84-108
    Average (%) 85 90 93
    1:4 Range (%) 80-95 82-95 80-112
    Average (%) 89 89 92
    1:8 Range (%) 89-100 81-89 86-96
    Average (%) 92 86 87
    1:16 Range (%) 87-102 87-115 84-94
    Average (%) 91 98 88

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4.吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据
    如有任何问题,请拨打电话 027-87879180 或填写 在线留言 我们会第一时间联系您。