PI Reagent (50μg/mL)
碘化丙啶(PI)染色液
规格: | / 50Tests / 100Tests / 200Tests / 500Tests |
价格: | / ¥70 / ¥110 / ¥190 / ¥390 |
货号:E-CK-A161
产品简介
Elabscience®自主研发的PI Reagent (50μg/mL) 为Annexin V鉴定凋亡和坏死细胞辅助试剂。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可与双链DNA特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,PI可进入细胞内对DNA进行染色,与Annexin V搭配使用,可区分处于不同凋亡时期的细胞。
试剂盒组成
产品编号 |
产品名称 |
50 Tests |
100 Tests |
200 Tests |
500 Tests |
Storage |
E-CK-A161 |
PI Reagent (50μg/mL) |
250 μL |
500 μL |
1 mL |
1.25 mLx2 |
2~8°C |
说明书 |
一份 |
本试剂搭配Annexin V-FITC检测喜树碱诱导的Jurkat细胞凋亡效果如下图所示:
Jurkat细胞用5 μM喜树碱(Camptothecin) (左) 或未加药 (右) 处理4 h,本试剂搭配Annexin V-FITC染色后,流式细胞仪荧光检测。Annexin V-FITC单阳细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI双阳细胞为坏死或晚期凋亡细胞,PI单阳细胞为裸核细胞。
实验操作指南步骤
1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次后,轻轻重悬细胞并计数。
注:本品仅在悬浮培养的细胞中验证,良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。
2. 取1~5 × 105重悬的细胞,300 g离心5 min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入500 μL稀释的1 × Annexin V Binding Buffer重悬细胞。
3. 细胞悬液中加入5 μL的Annexin V- 荧光染色液和5 μL的PI Reagent (50μg/mL)。
4. 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20 min。
5. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
保存条件
2~8°C可保存1年。PI Reagent (50μg/mL)需要避光保存。
注意事项
1. 保质期1年,为获得最佳的使用效果,请在3~6个月内使用。
2. 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
3. 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。