QuicKey Human IgM(Immunoglobulin M) ELISA Kit

产品货号:E-TSEL-H0010

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥1800 / ¥1250

货号:E-TSEL-H0010

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: Human

检测范围: 7.80~500 ng/mL

灵敏度: 1.02 ng/mL

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    QuicKey系列

    与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。

    基础参数

    反应类型 双抗体夹心法ELISA
    规格 96T/48T
    反应时间 2.5 h
    反应性
    检测方法 比色法
    检测范围 7.80-500 ng/mL
    灵敏度 1.02 ng/mL
    上样体积 50 μL/孔
    样本类型 血清,血浆,唾液和尿液
    特异性 可检测样本中的人 IgM , 且与其它类似物无明显交叉反应。
    重复性 板内,板间变异系数均<10%。
    用途 该试剂盒用于体外定量检测人 血清,血浆,唾液和尿液中IgM浓度。其它相关生物液体请咨询技术支持。

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 IgM抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)及生物素化的抗人 IgM抗体同时加入酶标板中,样本(或标准品)中的人 IgM会与包被抗体结合,同时抗人 IgM抗体与结合在包被抗体上的人 IgM结合,游离的成分被洗去。再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IgM浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IgM的浓度。

    试剂盒组分及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃ 保存6个月;试剂盒组分开封后请按照下表中的条件分别保存。

    中文名称 规格 开封后保存条件
    ELISA 酶标板 96T:8 孔×12 条
    48T:8 孔×6 条
    冻干标准品 96T:2 支
    48T:1 支
    2-8℃,复溶后当天使用
    标准品&样品稀释液 1瓶 20mL 2-8℃
    生物素化抗体工作液 1瓶 6mL
    酶结合物稀释液 1瓶 14mL
    浓缩洗涤液 1瓶 30mL
    浓缩HRP酶结合物(100×) 96T:1支 120μL
    48T:1支 60μL
    2-8℃ (避光)
    底物溶液(TMB) 1瓶 10mL
    反应终止液 1瓶 10mL 2-8℃
    封板覆膜 5张
    产品说明书 1 份
    质检报告 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。试剂体积以实际发货版说明书为准。 相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

    2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

    3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水

    4. 吸水纸

    技术数据

    样本测值参考

    sandwich-Ab-ELISA-Elabscience

    标曲示例

    以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线 。

    浓度:ng/mL 500 250 125 62.5 31.3 15.63 7.80 0
    OD 2.594 1.928 1.405 0.836 0.524 0.315 0.188 0.063
    校正OD 2.531 1.865 1.342 0.773 0.461 0.252 0.125 -
    sandwich-Ab-ELISA-Elabscience

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。

    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    批内变异系数 批间变异系数
    样本 1 2 3 1 2 3
    数量 20 20 20 20 20 20
    平均值(ng/mL) 20.40 57.60 229.31 21.61 62.32 248.67
    标准差 1.21 2.63 12.59 1.11 3.00 12.86
    变异系数 (%) 5.93 4.57 5.49 5.14 4.81 5.17

    回收率

    分别往不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率 。

    样本类型 回收率范围 (%) 平均回收率 (%)
    血清(n=8) 93-101 98
    血浆(EDTA)(n=8) 97-106 100
    唾液(n=8) 88-95 91
    尿液(n=8) 80-112 104

    线性

    分别往4个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将4个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率 。

    血清(n=4) 血浆(EDTA) (n=4) 唾液(n=4) 尿液(n=4)
    1:2 回收率范围(%) 91-102 84-98 89-100 92-120
    平均回收率(%) 98 91 97 104
    1:4 回收率范围(%) 94-106 99-110 91-102 105-117
    平均回收率(%) 102 102 99 110
    1:8 回收率范围(%) 96-104 87-94 97-110 88-115
    平均回收率(%) 99 91 104 99
    1:16 回收率范围(%) 88-98 88-99 102-112 87-120
    平均回收率(%) 94 92 105 106

    靶标信息

    研究背景

    免疫球蛋白M (IgM)是血液和淋巴液中发现的一类免疫球蛋白,是针对感染产生的第一种抗体。IgM抗体占人体所有抗体的5%到10%。IgM主要与初级抗体反应有关,最初抗原侵入后不久即出现,在抗原首次引入时就能破坏抗原。血清浓度的正常平均值为120毫克/分升。IgM是第一个在人类胎儿(大约20周)中表达的免疫球蛋白,在系统发育中是最早的抗体。IgM抗体出现在感染的早期,通常在进一步暴露后,会较小程度上重新出现。IgM抗体不会通过人胎盘(只有同型IgG才可)。IgM的生物学特性使其在感染性疾病的诊断中非常有用。

    研究领域

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    文献引用

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    实验操作

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37°C孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37°C孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37°C孵育15分钟左右
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据
    如有任何问题,请拨打电话 027-87879180 或填写 在线留言 我们会第一时间联系您。