QuicKey Human NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit

产品货号:E-TSEL-H0003

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-TSEL-H0003

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: Human

检测范围: 0.13~8 ng/mL

灵敏度: 0.06 ng/mL

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    QuicKey系列

    与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。

    基础参数

    反应类型 双抗体夹心法ELISA
    规格 96T/48T
    反应时间 2.5 h
    反应性
    检测方法 比色法
    检测范围 0.13-8 ng/mL
    灵敏度 0.06 ng/mL
    上样体积 50 μL/孔
    样本类型 血清,血浆和尿液
    特异性 可检测样本中的人 NGAL , 且与其它类似物无明显交叉反应。
    重复性 板内,板间变异系数均<10%。
    用途 该试剂盒用于体外定量检测人 血清,血浆和尿液中NGAL浓度。其它相关生物液体请咨询技术支持。

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 NGAL抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)及生物素化的抗人 NGAL抗体同时加入酶标板中,样本(或标准品)中的人 NGAL会与包被抗体结合,同时抗人 NGAL抗体与结合在包被抗体上的人 NGAL结合,游离的成分被洗去。再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,NGAL浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中NGAL的浓度。

    试剂盒组分及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃ 保存6个月;试剂盒组分开封后请按照下表中的条件分别保存。

    中文名称 规格 开封后保存条件
    ELISA 酶标板 96T:8 孔×12 条
    48T:8 孔×6 条
    冻干标准品 96T:2 支
    48T:1 支
    2-8℃,复溶后当天使用
    标准品&样品稀释液 1瓶 20mL 2-8℃
    生物素化抗体工作液 1瓶 6mL
    酶结合物稀释液 1瓶 14mL
    浓缩洗涤液 1瓶 30mL
    浓缩HRP酶结合物(100×) 96T:1支 120μL
    48T:1支 60μL
    2-8℃ (避光)
    底物溶液(TMB) 1瓶 10mL
    反应终止液 1瓶 10mL 2-8℃
    封板覆膜 5张
    产品说明书 1 份
    质检报告 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。试剂体积以实际发货版说明书为准。 相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

    2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

    3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水

    4. 吸水纸

    技术数据

    样本测值参考

    sandwich-Ab-ELISA-Elabscience

    标曲示例

    以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线 。

    浓度:ng/mL 8 4 2 1 0.5 0.25 0.13 0
    OD 2.569 2.13 1.533 1.088 0.656 0.437 0.225 0.059
    校正OD 2.51 2.071 1.474 1.029 0.597 0.378 0.166 -
    sandwich-Ab-ELISA-Elabscience

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。

    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    批内变异系数 批间变异系数
    样本 1 2 3 1 2 3
    数量 20 20 20 20 20 20
    平均值(ng/mL) 0.37 0.90 3.57 0.35 0.81 3.73
    标准差 0.02 0.04 0.16 0.02 0.04 0.17
    变异系数 (%) 5.41 4.44 4.48 5.71 4.94 4.56

    回收率

    分别往不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率 。

    样本类型 回收率范围 (%) 平均回收率 (%)
    血清(n=8) 86-100 94
    血浆(EDTA)(n=8) 101-110 104
    尿液(n=8) 87-98 90

    线性

    分别往4个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将4个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率 。

    血清(n=4) 血浆(EDTA) (n=4) 尿液(n=4)
    1:2 回收率范围(%) 88-99 90-101 101-110
    平均回收率(%) 91 96 104
    1:4 回收率范围(%) 95-105 92-102 96-109
    平均回收率(%) 99 97 102
    1:8 回收率范围(%) 87-96 86-100 98-111
    平均回收率(%) 92 93 105
    1:16 回收率范围(%) 101-111 90-98 100-110
    平均回收率(%) 105 95 104

    靶标信息

    研究背景

    中性粒细胞白明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL),或称Lipocalin 2 和Lcn2,是一个大小约25 kDa的蛋白,它是脂钙素超家族的一员,是各种炎症过程的多效介质。NGAL原是一种与人中性粒细胞基质金属蛋白酶9 (MMP-9)相关的蛋白。脂蛋白是一种胞外蛋白,它们具有共同的三级结构,形成类似于桶状的疏水配体结合位点。当与MMP-9结合时,NGAL可保护其免受蛋白水解降解,维持MMP-9的蛋白水解活性。NGAL由多种类型的细胞释放,是炎症、缺血、感染和肾脏损害的一种生物标志物。正如在肥胖和相关疾病中观

    研究领域

    数据库

    SwissProt P80188 Human
    Entrez Gene 3934 Human

    别称

    LCN2, Lipocalin 2, Oncogene 24p3, MSFI

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    文献引用

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    实验操作

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37°C孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37°C孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37°C孵育15分钟左右
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据
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