QuicKey Human RBP4(Retinol Binding Protein 4) ELISA Kit

产品货号:E-TSEL-H0006

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-TSEL-H0006

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: Human

检测范围: 3.13~100 ng/mL

灵敏度: 1.98 ng/mL

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    QuicKey系列

    与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。

    基础参数

    反应类型 双抗体夹心法ELISA
    规格 96T/48T
    反应时间 2.5 h
    反应性
    检测方法 比色法
    检测范围 3.13-100 ng/mL
    灵敏度 1.98 ng/mL
    上样体积 50 μL/孔
    样本类型 血清,血浆和尿液
    特异性 可检测样本中的人 RBP4 , 且与其它类似物无明显交叉反应。
    重复性 板内,板间变异系数均<10%。
    用途 该试剂盒用于体外定量检测人 血清,血浆和尿液中RBP4浓度。其它相关生物液体请咨询技术支持。

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人 RBP4抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)及生物素化的抗人 RBP4抗体同时加入酶标板中,样本(或标准品)中的人 RBP4会与包被抗体结合,同时抗人 RBP4抗体与结合在包被抗体上的人 RBP4结合,游离的成分被洗去。再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,RBP4浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中RBP4的浓度。

    试剂盒组分及保存

    未拆封的试剂盒可在2-8℃ 保存6个月;试剂盒组分开封后请按照下表中的条件分别保存。

    中文名称 规格 开封后保存条件
    ELISA 酶标板 96T:8 孔×12 条
    48T:8 孔×6 条
    冻干标准品 96T:2 支
    48T:1 支
    2-8℃,复溶后当天使用
    标准品&样品稀释液 1瓶 20mL 2-8℃
    生物素化抗体工作液 1瓶 6mL
    酶结合物稀释液 1瓶 14mL
    浓缩洗涤液 1瓶 30mL
    浓缩HRP酶结合物(100×) 96T:1支 120μL
    48T:1支 60μL
    2-8℃ (避光)
    底物溶液(TMB) 1瓶 10mL
    反应终止液 1瓶 10mL 2-8℃
    封板覆膜 5张
    产品说明书 1 份
    质检报告 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。试剂体积以实际发货版说明书为准。 相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

    2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

    3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水

    4. 吸水纸

    技术数据

    样本测值参考

    sandwich-Ab-ELISA-Elabscience

    标曲示例

    以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线 。

    浓度:ng/mL 100 50 25 12.5 6.25 3.13 0
    OD 2.549 1.752 0.924 0.423 0.175 0.099 0.071
    校正OD 2.478 1.681 0.853 0.352 0.104 0.028 -
    sandwich-Ab-ELISA-Elabscience

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。

    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    批内变异系数 批间变异系数
    样本 1 2 3 1 2 3
    数量 20 20 20 20 20 20
    平均值(ng/mL) 4.61 11.48 43.50 4.80 11.26 42.82
    标准差 0.24 0.53 1.81 0.25 0.51 1.94
    变异系数 (%) 5.21 4.62 4.16 5.21 4.53 4.53

    回收率

    分别往不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率 。

    样本类型 回收率范围 (%) 平均回收率 (%)
    血清(n=8) 89-102 96
    血浆(EDTA)(n=8) 91-105 99
    尿液(n=8) 89-97 92

    线性

    分别往4个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将4个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率 。

    血清(n=4) 血浆(EDTA) (n=4) 尿液(n=4)
    1:2 回收率范围(%) 90-101 88-96 99-110
    平均回收率(%) 98 92 104
    1:4 回收率范围(%) 85-100 95-109 88-101
    平均回收率(%) 92 101 96
    1:8 回收率范围(%) 100-109 100-109 92-101
    平均回收率(%) 103 105 95
    1:16 回收率范围(%) 101-109 99-108 90-101
    平均回收率(%) 105 102 93

    靶标信息

    研究背景

    视黄醇结合蛋白4 (RBP4),以前称为视黄醇结合蛋白(RBP),它是一种转运蛋白。这种蛋白质属于脂肪钙蛋白家族,是血液中视黄醇(维生素A醇)的特定载体。它将视黄醇从肝脏储存到周围组织。在血浆中RBP -视黄醇复合物与转导蛋白相互作用,通过肾小球滤过阻止其损失。缺乏维生素A,会阻碍翻译后结合蛋白的分泌,导致对表皮细胞的传递和供应有缺陷。RBP4似乎与炎症性慢性疾病(包括肥胖、2型糖尿病、代谢综合征和心血管疾病)的心血管代谢标志物相关。

    研究领域

    数据库

    SwissProt P02753 Human
    Entrez Gene 5950 Human

    别称

    PRBP, RBP

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    文献引用

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    实验操作

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37°C孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37°C孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37°C孵育15分钟左右
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据
    如有任何问题,请拨打电话 027-87879180 或填写 在线留言 我们会第一时间联系您。