Rat Ang-Ⅱ(Angiotensin Ⅱ) ELISA Kit

产品货号:E-EL-R1430c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-EL-R1430c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 大鼠

检测范围: 15.63~1000 pg/mL

灵敏度: 9.38 pg/mL

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  • 文献(8)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组Ang-Ⅱ浓度。

    检测原理

    本试剂盒采用竞争ELISA法。用大鼠Ang-Ⅱ抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠Ang-Ⅱ与包被的大鼠Ang-Ⅱ竞争生物素标记的抗大鼠Ang-Ⅱ单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠Ang-Ⅱ浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠Ang-Ⅱ的浓度。

    反应类型 竞争法
    规格 96T
    反应时间 2.0h
    反应性 大鼠
    检测方法 Colormetric
    检测范围 15.63-1000 pg/mL
    灵敏度 9.38 pg/mL
    样本体积 50μL
    样本类型 血清、血浆或其他相关生物液体

    特异性

    可检测样本中的大鼠Ang-Ⅱ,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (pg/mL) O.D Average
    1000 0.358
    0.366
    0.362
    500 0.444
    0.502
    0.473
    250 0.683
    0.655
    0.669
    125 0.961
    0.993
    0.977
    62.5 1.386
    1.364
    1.375
    31.25 1.792
    1.772
    1.782
    15.63 2.101
    2.115
    2.108
    0 2.57
    2.578
    2.574

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (pg/mL)
    46.80 133.70 360.10 46.10 133.40 382.00
    Standard
    deviation
    3.00 7.60 13.00 3.20 7.10 15.70
    C V (%) 6.41 5.68 3.61 6.94 5.32 4.11

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 88-100 94
    EDTA plasma (n=5) 90-104 96
    Cell culture media (n=5) 84-96 91

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 92-107 94-107
    Average (%) 90 98 100
    1:4 Range (%) 84-95 91-103 96-108
    Average (%) 90 97 102
    1:8 Range (%) 86-97 90-102 98-113
    Average (%) 92 96 104
    1:16 Range (%) 89-100 87-101 93-108
    Average (%) 94 94 100

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4.吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. 文献: K. Zhang et al. COPD rat model is more susceptible to cold stress and PM2.5 exposure and the underlying mechanism [J]. Environmental Pollution 241 (2018) 26-34.
      样品类型: Tissue homogenate
    2. 文献: Liu J, Guo L, Zhang K, et al. The probable roles of valsartan in alleviating chronic obstructive pulmonary disease following co-exposure to cold stress and fine particulate matter[J]. Environmental Toxicology and Pharmacology, 2018, 60:230.
      样品类型: Tissue homogenate
    3. 文献: Zeng M, Zhang L, Li M, et al. Mechanism of the diuretic activity of Descurainia sophia seed[J]. Bangladesh Journal of Pharmacology, 13(2): 157-163, May 15, 2018.
      样品类型: Urine
    4. 文献: Yuan P , Zheng X , Li M , et al. Two Sulfur Glycoside Compounds Isolated from Lepidium apetalum Willd Protect NRK52e Cells against Hypertonic-Induced Adhesion and Inflammation by Suppressing the MAPK Signaling Pathway and RAAS[J]. Molecules, 2017, 22(11):1956.
      样品类型: Cell culture supernatant
    5. 文献: Amara V R, Surapaneni S K, Tikoo K. Dysregulation Of MicroRNAs And Renin-Angiotensin System In High Salt Diet-Induced Cardiac Dysfunction In Uninephrectomized Rats[J]. PloS one, 2017.
      样品类型: Plasma
    6. 文献: Yuan P P, Zheng X K, Li M, et al. Two Sulfur Glycoside Compounds Isolated From Lepidium Apetalum Willd Protect NRK52e Cells Against Hypertonic-Induced Adhesion And Inflammation By Suppressing The MAPK Signaling Pathway And RAAS[J]. Molecules, 2017.
      样品类型: Cell culture supernatant
    7. 文献: Hohl M. Modulation Of The Sympathetic Nervous System By Renal Denervation Prevents Reduction Of Aortic Distensibility In Atherosclerosis Prone ApoE-Deficient Rats[J]. Journal of Translational Medicine, 2016.
      样品类型: Tissue homogenate
    8. 文献: Zhou Q, Pan X, Wang L, et al. The Protective Role Of Neuregulin-1: A Potential Therapy For Sepsis-Induced Cardiomyopathy[J]. European Journal of Pharmacology, 2016, 788: 234-240.
      样品类型: Serum
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