Rat IL-10(Interleukin 10) ELISA Kit

产品货号:E-EL-R0016c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-EL-R0016c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 大鼠

检测范围: 31.25~2000 pg/mL

灵敏度: 18.75 pg/mL

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  • 文献(14)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测大鼠Serum, plasma and other biological fluids中天然及部分重组IL-10浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠IL-10抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠IL-10会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠IL-10抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠IL-10抗体与结合在包被抗体上的大鼠IL-10结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IL-10浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-10的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 大鼠
    检测方法 Colormetric
    检测范围 31.25—2000 pg/mL
    灵敏度 18.75 pg/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 Serum, plasma and other biological fluids

    特异性

    可检测样本中的大鼠IL-10,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (pg/mL) O.D Average Corrected
    2000 2.348
    2.37
    2.359 2.28
    1000 1.655
    1.691
    1.673 1.594
    500 0.994
    0.976
    0.985 0.906
    250 0.423
    0.455
    0.439 0.36
    125 0.291
    0.287
    0.289 0.21
    62.5 0.186
    0.172
    0.179 0.1
    31.25 0.125
    0.137
    0.131 0.052
    0 0.075
    0.083
    0.079 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (pg/mL)
    94.40 238.30 785.60 92.10 254.40 747.70
    Standard
    deviation
    5.90 13.60 23.60 5.20 14.50 32.90
    C V (%) 6.25 5.71 3.00 5.65 5.70 4.40

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 85-99 92
    EDTA plasma (n=5) 93-104 98
    Cell culture media (n=5) 92-105 98

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 92-105 89-105 89-104
    Average (%) 97 96 95
    1:4 Range (%) 98-114 84-96 98-113
    Average (%) 104 91 105
    1:8 Range (%) 96-112 83-96 92-108
    Average (%) 102 90 98
    1:16 Range (%) 96-109 82-98 98-111
    Average (%) 102 89 105

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1.对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟
    2.弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟
    3.弃掉板内液体,洗板3次
    4.每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    5.每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    6.每孔加入50μL终止液
    7.立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. 文献: Zhang G Y, Lu D, Duan S F, et al. Hydrogen Sulfide Alleviates Lipopolysaccharide-Induced Diaphragm Dysfunction in Rats by Reducing Apoptosis and Inflammation through ROS/MAPK and TLR4/NF-κB Signaling Pathways[J]. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2018, 2018.
      样品类型: Cells
    2. 文献: Duan N, Hou A J, Luan B, et al. Gambogic Acid Exerts Cardioprotective Effects In A Rat Model Of Acute Myocardial Infarction Through Inhibition Of Inflammation, iNOS And NFκB/p38 Pathway[J]. Experimental and Therapeutic Medicine, 2018, 15: 1742-1748.
      样品类型: Serum
    3. 文献: Salem H A, Wadie W. Effect Of Niacin On Inflammation And Angiogenesis In A Murine Model Of Ulcerative Colitis[J]. Scientific Reports, 2017.
      样品类型: Tissue homogenate
    4. 文献: Wadie W, El-Tanbouly D M. Vinpocetine Mitigates Proteinuria And Podocytes Injury In A Rat Model Of Diabetic Nephropathy[J]. European Journal of Pharmacology, 2017, 814: 187-195.
      样品类型: Serum
    5. 文献: Wu D, Luo N, Wang L, et al. Hydrogen Sulfide Ameliorates Chronic Renal Failure In Rats By Inhibiting Apoptosis And Inflammation Through ROS/MAPK And NF-κB Signaling Pathways[J]. Scientific Reports, 2017.
      样品类型: Tissue homogenate
    6. 文献: Liu F, Chang X, Tian M, et al. Nano NIO Induced Liver Toxicity Via Activating The NF-κB Signaling Pathway In Rats[J]. Toxicology Research, 2017, 6(2): 242-250.
      样品类型: Tissue homogenate
    7. 文献: Lu H, Wang B. Sirt1 Exerts Neuroprotective Effects By Attenuating Cerebral Ischemia/Reperfusion-Induced Injury Via Targeting P53/Microrna-22[J]. International Journal of Molecular Medicine, 2017, 39(1): 208-216.
      样品类型: Tissue homogenate
    8. 文献: Karamese M, Aydin H, Sengul E, et al. The Immunostimulatory Effect Of Lactic Acid Bacteria In A Rat Model[J]. Iranian Journal of Immunology, 2016, 13(3): 220-228.
      样品类型: Serum
    9. 文献: Karamese M, Erol H S, Albayrak M, et al. Anti-Oxidant And Anti-Inflammatory Effects Of Apigenin In A Rat Model Of Sepsis: An Immunological, Biochemical, And Histopathological Study[J]. Immunopharmacology & Immunotoxicology, 2016, 38(3): 228-237.
      样品类型: Serum
    10. 文献: Yang J, Liu X X, Fan H, et al. Extracellular Vesicles Derived From Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Protect Against Experimental Colitis Via Attenuating Colon Inflammation, Oxidative Stress And Apoptosis[J]. Plos One, 2015.
      样品类型: Tissue homogenate
    11. 文献: Qin J, Ma X, Qi H, et al. Transplantation Of Induced Pluripotent Stem Cells Alleviates Cerebral Inflammation And Neural Damage In Hemorrhagic Stroke[J]. Plos One, 2015.
      样品类型: Tissue homogenate
    12. 文献: Zúigamuoz A M, Guarner L V, Soriacastro E, et al. 17β Estradiol Modulates Perfusion Pressure And Expression Of 5-LOX And CYP450 4A In The Isolated Kidney Of Metabolic Syndrome Female Rats[J]. International Journal of Endocrinology, 2015.
      样品类型: Tissue homogenate
    13. 文献: Lu X, Mccoy K S, Xu J, et al. Galectin-9 Ameliorates Respiratory Syncytial Virus-Induced Pulmonary Immunopathology Through Regulating The Balance Between Th17 And Regulatory T Cells[J]. Virus Research, 2014, 195:162-171.
      样品类型: Tissue homogenate
    14. 文献: Barquilla P C, Pagano E S, Jiménez-Ortega V, et al. Melatonin Normalizes Clinical And Biochemical Parameters Of Mild Inflammation In Diet-Induced Metabolic Syndrome In Rats[J]. Journal of Pineal Research, 2014, 57(3): 280-90.
      样品类型: Plasma
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