Rat LEP(Leptin) ELISA Kit

产品货号:E-EL-R0582c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-EL-R0582c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 大鼠

检测范围: 0.16~10 ng/mL

灵敏度: 0.10 ng/mL

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  • 文献(17)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测大鼠Serum, plasma and other biological fluids中天然及部分重组LEP浓度

    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠LEP抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠LEP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠LEP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠LEP抗体与结合在包被抗体上的大鼠LEP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,LEP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中LEP的浓度。

    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 大鼠
    检测方法 Colormetric
    检测范围 0.16—10 ng/mL
    灵敏度 0.10 ng/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 Serum, plasma and other biological fluids

    特异性

    可检测样本中的大鼠LEP,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average Corrected
    10 2.264
    2.31
    2.287 2.226
    5 1.424
    1.426
    1.425 1.364
    2.5 0.81
    0.8
    0.805 0.744
    1.25 0.373
    0.387
    0.38 0.319
    0.63 0.226
    0.22
    0.223 0.162
    0.31 0.154
    0.144
    0.149 0.088
    0.16 0.107
    0.109
    0.108 0.047
    0 0.056
    0.066
    0.061 --

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    0.50 1.50 4.40 0.50 1.50 4.80
    Standard
    deviation
    0.03 0.08 0.17 0.03 0.08 0.23
    C V (%) 6.00 5.33 3.86 6.00 5.33 4.79

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 94-107 101
    EDTA plasma (n=5) 85-98 91
    Cell culture media (n=5) 95-109 102

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 94-108 88-104 83-97
    Average (%) 102 95 90
    1:4 Range (%) 98-114 88-101 93-106
    Average (%) 106 93 99
    1:8 Range (%) 93-110 86-98 96-112
    Average (%) 101 91 104
    1:16 Range (%) 100-116 84-97 95-107
    Average (%) 108 90 102

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2 支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4. 吸水纸

    操作步骤

    1.对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟
    2.弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟
    3.弃掉板内液体,洗板3次
    4.每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    5.每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    6.每孔加入50μL终止液
    7.立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. 文献: Lembede B W, Joubert J, Nkomozepi P, et al. Insulinotropic Effect of S-Allyl Cysteine in Rat Pups[J]. Preventive nutrition and food science, 2018, 23(1): 15.
      样品类型: Plasma
    2. 文献: DiK B, BAHCIVAN E, ESER FAKI H, et al. Combined Treatment with Interlukin-1 and Tumor Necrosis Factor-Alpha Antagonists Improve Type 2 Diabetes in Rats[J]. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 2018 (ja).
    3. 文献: Lembede B W, Erlwanger K H, Nkomozepi P, et al. Effect Of Neonatal Orally Administered S-allyl Cysteine In High-Fructose Diet Fed Wistar Rats[J]. Journal of Developmental Origins Of Health And Disease, 2017.
      样品类型: Plasma
    4. 文献: Yu J, Yang J, Luo Y, et al. The Adverse Effects Of Chronic Low-Dose Exposure To Nonylphenol On Type 2 Diabetes Mellitus In High Sucrose-High Fat Diet-Treated Rats[J]. Islets, 2017.
      样品类型: Plasma
    5. 文献: Adamu H A, Imam M U, Ooi D J, et al. In Utero Exposure To Germinated Brown Rice And Its Oryzanol-Rich Extract Attenuated High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In F1 Generation Of Rats[J]. BMC Complementary and Alternative Medicine, 2017, 17: 67-75.
      样品类型: Serum
    6. 文献: Adamu H A, Imam M U, Ooi D J, et al. Perinatal Exposure To Germinated Brown Rice And Its Gamma Amino-Butyric Acid-Rich Extract Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In First Generation Rat Offspring[J]. Food & Nutrition Research, 2016.
      样品类型: Serum
    7. 文献: López Y R, Péreztorres I, Zúigamuoz A, et al. Effect Of Glycine On Adipocyte Hypertrophy In A Metabolic Syndrome Rat Model[J]. Current Drug Delivery, 2016, 13(1): 158-169.
      样品类型: Serum
    8. 文献: Mu Y, Yan W J, Yin T L, et al. Curcumin Ameliorates HighFat DietInduced Spermatogenesis Dysfunction[J]. Molecular Medicine Reports, 2016, 14(4): 3588-3594.
      样品类型: Serum
    9. 文献: Yang M, Yan W J, Yin T L, et al. Curcumin Ameliorates High-Fat Diet-Induced Spermatogenesis Dysfunction[J]. Molecular Medicine Reports, 2016, 14(4): 3588-3594.
      样品类型: Serum
    10. 文献: Wu Q M, Ni H X, Lu X. Changes Of Adipocytokine Expression After Diabetic Rats Received Sitagliptin And The Molecular Mechanism [J]. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, 2016, 9(9): 893-897.
      样品类型: Serum
    11. 文献: Zhang Y D, Imam M U, Ismail M, et al. Edible Bird'S Nest Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In Rats[J]. Journal of Diabetes Research, 2015.
      样品类型: Serum
    12. 文献: Yida Z, Imam M U, Ismail M, et al. N-Acetylneuraminic Acid Attenuates Hypercoagulation On High Fat Diet-Induced Hyperlipidemic Rats[J]. Food & Nutrition Research, 2015.
      样品类型: Serum
    13. 文献: Yida Z, Imam M U, Ismail M, et al. N-Acetylneuraminic Acid Supplementation Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In Rats Through Transcriptional And Nontranscriptional Mechanisms[J]. BioMed Research International, 2015.
      样品类型: Serum
    14. 文献: Zhang Y, Imam M U, Ismail M, et al. N-Acetylneuraminic Acid Attenuates Hypercoagulation On High Fat Diet-Induced Hyperlipidemic Rats[J]. Food & Nutrition Research, 2015, 59: 29046-29055.
      样品类型: Serum
    15. 文献: Zhang Y, Imam M U, Ismail M, et al. Edible Bird’S Nest Attenuates Procoagulation Effects Of High-Fat Diet In Rats[J]. Drug Design, Development and Therapy, 2015, 9 : 3951-3959.
      样品类型: Serum
    16. 文献: Yida Z, Imam Mu, Ismail M, et al. Edible Bird'S Nest Prevents High Fat Diet-Induced Insulin Resistance In Rats[J]. Journal of Diabetes Research, 2015.
      样品类型: Serum
    17. 文献: Yan W J, Mu Y, Yu N, et al. Protective Effects Of Metformin On Reproductive Function In Obese Male Rats Induced By High-Fat Diet[J]. Journal of Assisted Reproduction & Genetics, 2015, 32(7): 1097-1104.
      样品类型: Serum
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