TGF-β1(Transforming Growth Factor Beta 1) ELISA Kit

产品货号:E-EL-0162c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2000 / ¥1400

货号:E-EL-0162c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: Universal

检测范围: 0.16~10 ng/mL

灵敏度: 0.10 ng/mL

  • 详情
  • 文献(25)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中TGF-β1浓度。


    背景介绍

    转化生长因子β1 (TGF-β1)是一种具有强力抗炎特性的多效性细胞因子,由于其参与脂质代谢、高血压和动脉粥样硬化的病理生理进程,被认为是缺血性卒中(IS)炎症反应过程中重要的高危因素。TGF-β1的基因位于19号染色体 (q13.1-13.3),包括7个外显子和6个内含子。TGF-β1蛋白遍布全身,在构成骨架的组织中尤为丰富,在早期发育过程中,骨架由强韧而富有弹性的骨骼和软骨组织构成,TGF-β1可以帮助调节这些组织的形成与发育。TGF-β1还参与了血管的形成,肌肉和脂肪组织的发育,伤口的愈合,免疫系统中的炎症反应进程并能预防肿瘤的生长。


    检测原理

    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗TGF-β1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的TGF-β1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GF-β1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗TGF-β1抗体与结合在包被抗体上的TGF-β1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,TGF-β1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中TGF-β1的浓度。

    反应类型

    夹心法

    规格

    96T

    反应时间

    3.5h

    反应性

    通用

    检测方法

    Colormetric

    检测范围

    0.1610 ng/mL

    灵敏度

    0.10 ng/mL

    样本体积

    100μL

    样本类型

    血清、血浆或其他相关生物液体

    特异性

    可检测样本中的TGF-β1,且与其它相关蛋白无明显交叉反应

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%


    样品活化方法

    生物样品中的通常以无活性的形式存在,在检测TGF-β1活性前必须进行活化处理。

    活化方法如下:

    血清、血浆: 280 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。

    注意:样品被稀释了10倍!

    细胞培养上清:20 μL标准品&样品稀释液中加入100 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。

    注意:样品被稀释了2倍!


    样本值

    血清/血浆:本实验对来自健康的人、大小鼠等样本进行了TGF-β1水平检测。

    样本类型

    样本来源

    样本值范围

    稀释倍数

    血清

    健康人(n=10)

    22.8-46.1 ng/mL

    10

    血浆

    健康人(n=10)

    12.7-43.1 ng/mL

    10

    血清

    健康小鼠(n=10)

    66.1-82.9 ng/mL

    10

    血清

    健康大鼠(n=10)

    35.4-66.5 ng/mL

    10

    血清

    健康猪(n=5)

    4.9-10.2 ng/mL

    10

    血清

    健康兔(n=5)

    2.9-6.5 ng/mL

    10

    血清

    健康犬(n=5)

    34.5-84.2 ng/mL

    10


    典型数据

    以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    ng/mL

    10

    5

    2.5

    1.25

    0.63

    0.32

    0.16

    0

    OD

    2.515

    1.645

    0.988

    0.506

    0.271

    0.183

    0.111

    0.057

    校正OD

    2.458

    1.588

    0.931

    0.449

    0.214

    0.126

    0.054

    -








    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

     

    批内变异系数

    批间变异系数

    样本

    1

    2

    3

    1

    2

    3

    数量

    20

    20

    20

    20

    20

    20

    平均值( MERGEFIELD 单位ng/mL)

    0.41

    1.07

    4.96

    0.47

    1.25

    4.24

    标准差

    0.02

    0.05

    0.22

    0.03

    0.06

    0.2

    变异系数 (%)

    4.88

    4.67

    4.43

    6.38

    4.8

    4.72


    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    样本类型

    回收率范围 (%)

    平均回收率 (%)

    血清(n=5)

    94-110

    102

    血浆(EDTA)(n=5)

    90-102

    96

    细胞上清(n=5)

    95-106

    98


    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

     

     

    血清(n=5)

    血浆(EDTA)(n=5)

    细胞上清(n=5)

    1:2

    回收率范围(%)

    99-108

    95-105

    92-104

    平均回收率(%)

    105

    102

    97

    1:4

    回收率范围(%)

    95-109

    90-100

    97-105

    平均回收率(%)

    102

    96

    100

    1:8

    回收率范围(%)

    89-103

    89-104

    96-108

    平均回收率(%)

    97

    97

    102

    1:16

    回收率范围(%)

    88-102

    98-108

    92-105

    平均回收率(%)

    94

    104

    100


    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称

    规格

    保存条件

    ELISA 酶标板

    8 ×12

    -20, 可存放6个月

    冻干标准品

    2

    浓缩生物素化抗体(100×)

    1  120μL

    浓缩HRP酶结合物(100×)

    1  120μL

    -20(避光), 可存放6个月

    标准品&样品稀释液

    1  20mL

    4,可存放6个月

    生物素化抗体稀释液

    1  14mL

    酶结合物稀释液

    1  14mL

    浓缩洗涤液

    1  30mL

    活化试剂1 (1M HCL)

    1  5mL

    室温,可存放6个月

    活化试剂2 (1.2M NaOH/ 0.5M HEPES)

    1  5mL

    底物溶液(TMB)

    1  10mL

    4(避光)

    反应终止液

    1  10mL

    4

    封板覆膜

    5

     

    产品说明书

    1

    质检报告

    1

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。


    试验所需自备物品

    1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

    2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL

    3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水

    4. 吸水纸


    操作步骤


    客户发表文献

    1. 文献: Zhang Z Z , Wang Q X , Liu Q , et al. Dual-Locking Nanoparticles Disrupt the PD-1/PD-L1 Pathway for Efficient Cancer Immunotherapy[J]. Advanced materials, 2019, 1905751.
      样品类型: Tissue homogenate
    2. 文献: Xin L B , Lin X N , Pan Y B , et al. A collagen scaffold loaded with human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells facilitates endometrial regeneration and restores fertility[J]. Acta Biomaterialia, 2019.
      样品类型: Cell culture supernatant
    3. 文献: Li X Y , Wei Z H , Lv H Y , et al. Iron oxide nanoparticles promote the migration of mesenchymal stem cells to injury sites[J]. International Journal of Nanomedicine, 2019, 14: 573-589.
      样品类型: Cell culture supernatant
    4. 文献: Gu T T , Chen T Y , Yang Y Z , et al. Pterostilbene alleviates fructose-induced renal fibrosis by suppressing TGF-β1/TGF-β type I receptor/Smads signaling in proximal tubular epithelial cells[J]. European Journal of Pharmacology, 2018.
      样品类型: Serum,Cell culture supernatant
    5. 文献: Nan Wang , et al. The Protective Role of Bacillus velezensis A2 on the Biochemical and Hepatic Toxicity of Zearalenone in Mice.Toxins, 2018, 10(11), 449.
      样品类型: Serum, Tissue homogenate
    6. 文献: Thu H E, Hussain Z, Mohamed I N, et al. Mechanistic Insight Into the Efficient Osteogenic Potential of Dihydrotestosterone: Exploring Sequential Expression of Bone-Related Protein Biomarkers[J]. Acta Medica Iranica, 2018, 56(4): 234-243.
      样品类型: Cells
    7. 文献: Fan X, Teng Y, Ye Z, et al. Gap junction-mediated MiR-200b on osteogenesis and angiogenesis in coculture between MSCs and HUVECs[J]. J Cell Sci, 2018: jcs. 216135.
      样品类型: Tissue homogenate
    8. 文献: Wang Y, Wu X. SMOC1 silencing suppresses the angiotensin IIinduced myocardial fibrosis of mouse myocardial fibroblasts via affecting the BMP2/Smad pathway[J]. Oncology Letters, 2018, 16(3): 2903-2910.
      样品类型: Plasmid
    9. 文献: Xia Y, Yu B, Ma C, et al. Yu Gan Long reduces rat liver fibrosis by blocking TGF-β1/Smad pathway and modulating the immunity[J]. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2018, 106: 1332-1338.
      样品类型: Serum
    10. 文献: Ke B J, Lee C L. Cordyceps Cicadae NTTU 868 Mycelium Prevents CCl 4-Induced Hepatic Fibrosis In BALB/c Mice Via Inhibiting The Expression Of Pro-Inflammatory And Pro-Fibrotic Cytokines[J]. Journal of Functional Foods, 2018, 43: 214-223.
    11. 文献: Giusti I, Di Francesco M D, D'Ascenzo S, et al. Leukocyte Depletion Does Not Affect The In Vitro Healing Ability Of Platelet Rich Plasma[J]. Experimental and Therapeutic Medicine, 2018, 15(4): 4029-4038.
    12. 文献: Li X, Wang G Y, QiLi M G, et al. Aspirin Reduces Cardiac Interstitial Fibrosis by Inhibiting Erk1/2-Serpine2 and P-Akt Signalling Pathways[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2018, 45(5): 1955-1965.
    13. 文献: Yuan P , Zheng X , Li M , et al. Two Sulfur Glycoside Compounds Isolated from Lepidium apetalum Willd Protect NRK52e Cells against Hypertonic-Induced Adhesion and Inflammation by Suppressing the MAPK Signaling Pathway and RAAS[J]. Molecules, 2017, 22(11):1956.
      样品类型: Cell culture supernatant
    14. 文献: Qian C, Kuang M, Wang Y. Effect Of Qianghuo Erhuang Decoction On T Regulatory And T Helper 17 Cells In Treatment Of Adjuvant-Induced Arthritis In Rats[J]. Scientific reports, 2017.
      样品类型: Serum
    15. 文献: Liu Y, Li Y, Xu Q, et al. Long Non-Coding RNA-ATB Promotes EMT During Silica-Induced Pulmonary Fibrosis By Competitively Binding miR-200c[J]. Biochimica Et Biophysica Acta-Molecular Basis of Disease, 2017.
      样品类型: Cell culture supernatant
    16. 文献: Yuan P P, Zheng X K, Li M, et al. Two Sulfur Glycoside Compounds Isolated From Lepidium Apetalum Willd Protect NRK52e Cells Against Hypertonic-Induced Adhesion And Inflammation By Suppressing The MAPK Signaling Pathway And RAAS[J]. Molecules, 2017.
      样品类型: Cell culture supernatant
    17. 文献: Wang X D, Lai R D, Su X F, et al. Edaravone Attenuates Lipopolysaccharide-induced Acute Respiratory Distress Syndrome Associated Early Pulmonary Fibrosis Via Inhibition Of Oxidative Stress And Transforming Growth Factor-β1/Smad3 Signaling[J]. Biochemical And Biophysical Research Communications, 2017.
      样品类型: Serum
    18. 文献: Zhang J G, Chen X J, Liu T, et al. Foxp3+ Associated With The Pro-Inflammatory Regulatory T And T Helper 17 Effector Cells In Asthma Patients[J]. Experimental and Therapeutic Medicine, 2016, 12(4): 2753-2758.
      样品类型: Plasma
    19. 文献: Li Z Z, Liu X H, Wang B Y, et al. Pirfenidone Suppresses MAPK Signaling Pathway To Reverse Epithelial-Mesenchymal Transition And Renal Fibrosis[J]. Nephrology, 2016.
      样品类型: Tissue homogenate
    20. 文献: Qin J, Wang L, Zheng L, et al. Concentrated Growth Factor Promotes Schwann Cell Migration Partly Through The Integrin Β1-Mediated Activation Of The Focal Adhesion Kinase Pathway[J]. International Journal of Molecular Medicine, 2016.
      样品类型: Cell culture supernatant
    21. 文献: Zhang L, Wang Y, Xia T, et al. Suppression For Lung Metastasis By Depletion Of Collagen I And Lysyl Oxidase Via Losartan Assisted With Paclitaxel-Loaded Ph-Sensitive Liposomes In Breast Cancer[J]. Drug Delivery, 2016.
      样品类型: Cell lysate
    22. 文献: Karamese M, Erol H S, Albayrak M, et al. Anti-Oxidant And Anti-Inflammatory Effects Of Apigenin In A Rat Model Of Sepsis: An Immunological, Biochemical, And Histopathological Study[J]. Immunopharmacology & Immunotoxicology, 2016, 38(3): 228-237.
      样品类型: Serum
    23. 文献: Zhili M, Tao H, Wen S, et al. Inhibition Of Hepatocyte Apoptosis: An Important Mechanism Of Corn Peptides Attenuating Liver Injury Induced By Ethanol[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2015, 16(9): 22062-22080.
      样品类型: Serum,Tissue homogenate
    24. 文献: Lu X, Mccoy K S, Xu J, et al. Galectin-9 Ameliorates Respiratory Syncytial Virus-Induced Pulmonary Immunopathology Through Regulating The Balance Between Th17 And Regulatory T Cells[J]. Virus Research, 2014, 195:162-171.
      样品类型: Tissue homogenate
    25. 文献: Dai M M, Wu H, Li H, et al. Effects And Mechanisms Of Geniposide On Rats With Adjuvant Arthritis[J]. International Immunopharmacology, 2014, 20(1): 46-53.
      样品类型: Cell lysate
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