TUNEL Assay Kit (Enhance TMR Red)[335]

产品货号:E-CK-A335

规格: / 20T / 50T / 100T
价格: / ¥1750 / ¥3100 / ¥4990

货号:E-CK-A335

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  • 产品简介

    Elabscience® TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是一种高灵敏度且快速简便的细胞凋亡检测方法。检测结果可通过荧光显微镜直接观察。

    本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片、爬片)的原位凋亡检测。


    检测原理

    细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,剪断核小体间的基因组DNA,暴露的3’-OH可在末端脱氧核酸转移酶(TdT)的催化下结合四甲基罗丹明-脱氧三磷酸尿苷(TMR Red-dUTP),即可通过荧光显微镜直接观察。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被标记。这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

    试剂盒中的增强型荧光标记液,包含TMR Red-dUTP和荧光增强型因子,荧光增强因子与TMR Red-dUTP非共价结合,增强稳定性并放大信号,使标记的荧光更亮且抗猝灭能力更强。


    试剂盒组成


    产品编号

    成分

    20 T

    50 T

    100 T

    Storage

     E-CK-A335A

     平衡液(5×)

    700 μL

    900 μL × 2

    3.6 mL

    -20°C

     E-CK-A335B

     TdT

    20 μL

    50 μL

    100 μL

    -20°C

     E-CK-A335C

     蛋白酶K(100 ×)

    20 μL

    50 μL

    100 μL

    -20°C

     E-CK-A335D

     增强型荧光标记液

    100 μL

    250 μL

    500 μL

    -20°C

     E-CK-A335E

     DNase I(2 U/μL)

    5 μL

    12 μL

    25 μL

    -20°C

     E-CK-A335F

     DNase I Buffer(10 ×)

    100 μL

    250 μL

    500 μL

    -20°C

                                    说明书

    一份




    自备试剂

    1、细胞样本

    固定液(4%多聚甲醛溶于PBS中,推荐使用Elabscience®E-IR-R113)。

    通透液(0.1%的Triton-100溶于0.1%柠檬酸钠,推荐使用Elabscience®E-IR-R122)。

    2、石蜡切片

    二甲苯、乙醇、PBS(推荐使用Elabscience®E-BC-R187)。

    3、冰冻切片

    固定液(4%多聚甲醛溶于PBS中,推荐使用Elabscience®E-IR-R113)。

    4、其他试剂 

        PBS、ddH2O、DAPI(推荐使用Elabscience®E-BC-R187)、含抗荧光淬灭剂的封片液(推荐使用Elabscience®E-IR-R119)。


    产品使用说明

    蛋白酶K(100 ×)[ E-CK-A335C]为浓缩液,实验前用PBS稀释成1×蛋白酶K工作液。

    例如,取1 μL蛋白酶(100 ×) [E-CK-A335C],加入到99 μL的PBS中,混匀即为1×蛋白酶工作液。

     

    保存条件

    -20°C 保存。增强型荧光标记液[E-CK-A335D]需避光保存。


    注意事项

    1.  保质期1年。为获得最佳的使用效果,请在3~6个月内使用。

    2.  TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂。一方面可以把凋亡和坏死细胞区分开,另一方面不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。

    3.  PBS清洗样本后,请尽量除去PBS溶液后再进行下一步操作。

    4.  实验过程中请保持样本的湿润,防止干片造成的实验失败。

    5.  TdT酶工作液现配现用,短暂于冰上保存,长期保存会导致酶失活影响实验结果。

    6.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    7.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    如有任何问题,请拨打电话 027-87879180 或填写 在线留言 我们会第一时间联系您。