在生命科学研究中，通常需要从各种不同的层面对生物体内发生的变化做出测定和判断。从分子层面到生物本体，包括基因、蛋白、细胞、组织、器官和生物体整体在内的各类指标，都是研究和测定的对象。生物体内许多重要的生命活动是发生在代谢物层面的，代谢物指标的变化不仅仅与基因和蛋白质的表达紧密相关，也受到生物体所处环境的外界因素影响。因此，代谢物检测能更加完整地描述生物体所处的状态，在疾病诊断、药物研发、营养科学、环境学、毒理学等领域发挥了重要作用。

代谢物检测通常使用化学反应的原理和检测手段，因此不受检测样本种属的限制。可用于代谢物检测的样本类型非常丰富，除了常见的体液、组织、细胞外，其他如肺泡灌洗液、材料/药物浸出液、食品、药品、化妆品等，都可以作为代谢物指标检测的样本。

如何有效地收集和保存样本，对于实验检测结果来说至关重要。本文为大家介绍代谢物检测样本的收集与保存方法。

01 血液样本

血液样本是最常见的代谢检测样本类型，包括全血、血清和血浆三种。

血清：将取到的新鲜血液在室温下静置30分钟，血液凝结后以2000×g离心10分钟，取上层淡黄色澄清液体，即为血清。

全血：在新鲜血液中加入抗凝剂，颠倒混匀充分抗凝，即得到全血样本。

血浆：在新鲜血液中加入抗凝剂，颠倒混匀充分抗凝，2000×g离心10分钟，取上层淡黄色透明液体即为血浆。

在收集血液的过程中，操作应尽量轻柔，减少碰撞和摩擦，并尽量避免溶血、脂血和黄疸现象的发生，以免对检测造成干扰。全血和血浆样本的制备过程中需要使用抗凝剂，肝素一般适用于绝大多数的代谢物检测。

全血样本不宜长期保存，在4°С可保存1-2天；如果在48小时内无法完成样本检测，应尽快将血液样本处理成血清或血浆，并分装冻存，避免反复冻融，一般4°С可保存1周，-20°С可保存1个月，-80°С可保存3个月。

02 组织样本

组织样本也是代谢物检测常见的样本类型，主要包括心脏、肝脏、肾脏、脾脏、消化道、肺、脑、肌肉等。

组织样本一般需要制备成匀浆液，再进行代谢物测定。如果暂时不准备进行检测，应将组织样本进行冻存，并避免反复冻融，一般4°С可保存1周，-20°С可保存1个月，-80°С可保存3个月。

制备匀浆时，将冻存的组织样本解冻，用2-8°C的PBS(0.01 M，pH 7.4)漂洗干净，滤纸拭干，称取0.02-0.5g组织块，放入匀浆容器中。通常按照组织重量(g):匀浆介质体积(mL)=1:9的比例加入匀浆介质，低温匀浆。4°С，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测。制备好的匀浆应在当天进行检测。

03 细胞样本

培养细胞样本因其培养周期短、成本低、调控简单、类型多的特点，受到越来越多的科研工作者喜爱。细胞样本通常有悬浮细胞和贴壁细胞两种类型。

悬浮细胞：一般在4°С下以1000×g离心10 min收集细胞，并按照每10⁶个细胞加入300-500 μL匀浆介质的比例进行机械匀浆，充分破碎（无明显的细胞沉淀，或在显微镜下观察）。4°С，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测。

贴壁细胞 ：一般先吸弃培养液，用冷的PBS（0.01 M，pH 7.4）轻轻将细胞洗一遍，然后用胰蛋白酶消化或细胞刮收集细胞，加入2-5 mL PBS（0.01 M，pH 7.4）制成细胞悬液，再按照悬浮细胞方式处理。代谢检测实验中更推荐使用细胞刮收集贴壁细胞。

除了机械匀浆之外，超声匀浆是比较有效的细胞破碎方式。可用超声波发生器以振幅14 μm超声处理30 s，使细胞破碎；或者用超声细胞破碎仪，200 W，按照超声2s间隙3 s的模式，破碎5 min，使用超声破碎仪时，须将样本保持在冰水浴中。

如果没有相关细胞破碎设备，也可使用反复冻融的方式对细胞进行破碎。一般用PBS溶液或双蒸水重悬细胞，再将细胞悬液进行“冷冻-融化-冷冻”循环，重复3次左右。但此法会使某些酶活力受影响，因此检测细胞样本的酶活力时不推荐使用该方式破碎细胞。

收集的细胞样本若暂时不测，可低温冻存，避免样本反复冻融。一般-20°С可保存1个月，-80℃可保存3个月。制备好的细胞匀浆建议不要冻存，需当天进行测定。

04 毛发样本

毛发的主要成分是蛋白质，通常可用于检测某些无机离子或氨基酸指标的含量。可使用酸水解的方法进行样本处理。通常取100 mg样本于玻璃试管中，加入1 mL浓盐酸（或以相同的样本-盐酸比例），密闭于95-100°С水浴中加热水解至无明显固体组织。取出冷却后用10 M和1 M浓度的氢氧化钠将pH值调节至中性，并定容后待测。定容后的样本可在4°С保存1-2天。

05 其他样本

唾液：禁食一小时后用清水或生理盐水漱口，用唾液采集器收集唾液；

尿液：采用无菌容器收集早晨的中段尿液样本，在采集过程中应注意避免阴道分泌物、精液、粪便等污染；

乳汁：使用无菌收集器取新鲜乳汁；

胸水：使用无菌注射器抽取胸水，并加入含有抗凝剂的试管中，操作中应严防空气进入胸腔，始终保持胸腔负压，用手控制针头的深度，以防穿刺过深刺伤肺脏，并注意抽取速度和抽取量。

以上样本收集后于4°С，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测，或在分装后进行冻存。一般4°С可保存1周，-20°С可保存1个月，-80°С可保存3个月。

规范样本的收集与制备方法和保存条件，有利于提高实验效率，提升数据准确定。