10× RBC Lysis/Fixation Solution

Elabscience^®的10×红细胞裂解液（RBC Lysis/Fixation Solution）用于人全血的流式样本处理。抗凝剂处理的全血直接加入荧光抗体染色孵育后，用红细胞裂解液对红细胞进行裂解与洗涤，即可上机分析。

当抗体加入到全血后，与白细胞特异性的表面抗原结合，染色后的样本加入1×红细胞裂解液处理，可在温和的低渗条件下裂解红细胞，保留完整的白细胞活性。

产品使用说明

10×红细胞裂解液（含固定剂）[E-CK-A106]为浓缩液，实验前加去离子水稀释成1×红细胞裂解液工作液。

例如：取1 mL的10×红细胞裂解液（含固定剂）[E-CK-A106]，加入到9 mL的去离子水中，充分混匀后的混合物即为1×红细胞裂解液工作液。工作液常温保存1周。

试剂组成

  10×红细胞裂解液（含固定剂）[E-CK-A106]的裂解效果。

加入裂解液充分反应并洗去上清之后，在流式细胞仪上检测。红细胞碎片和血小板可以通过在FSC-H vs FSC-A图中划对角线门（如上左图所示）进行排除。在对角线上的的细胞门中，淋巴细胞、单核细胞和粒细胞等三群细胞分群清晰可见。

实验操作指南

1.    100 μL全血加入流式管中。

2.    按照抗体说明书，取适量的流式抗体添加到流式管中。

3.    轻轻涡旋混匀后，4°C避光孵育30分钟。

4.    加入2 mL 1x红细胞裂解液工作液。

5.    轻轻涡旋混匀，室温下避光孵育10分钟。

6.    500 g离心5分钟，弃上清。

7.    加入2 mL PBS重悬细胞。500 g离心5分钟，弃上清。

8.    加入0.5 mL Cell Staining Buffer重悬细胞。

9.    流式细胞仪分析。

保存条件

  2~8°C保存，一年有效。

注意事项

1. 使用EDTA作为抗凝血剂。

2. 由于本试剂不能溶解有细胞核的红细胞，可能存在有细胞核红细胞的样本(如儿童样本)可能导致红细胞裂解不完全。

3. 当使用的流式抗体与血清蛋白存在交叉反应时，血样在染色和溶解前应当用1X PBS或生理盐水冲洗，以除去血清蛋白。

4. 本裂解液含固定成分，可能会对APC/Cyanine7等串联染料抗体的荧光信号有破坏，请谨慎使用。