DAPI Reagent (1 μg/mL)

产品简介

DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用荧光显微镜观测。DAPI可以透过完整的细胞膜，可用于活细胞和固定细胞的染色。CAS Number 28718-90-3。

DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到呈蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100%) ，且DAPI对活细胞无毒副作用。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA着色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到细胞核的形态发生变化。

DAPI染色液的最大激发波长为340 nm，最大发射波长为488 nm，DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360 nm，最大发射波长为460 nm。

本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。

产品组成

实验操作指南

1.固定后的细胞或组织样品，适当洗涤去除固定剂。如需要进行免疫荧光染色，可先进行，染完毕后再用DAPI染核。如果不需要进行其它染色，可直接进行DAPI染色。

2.贴壁细胞或组织切片，可加入少量DAPI染色液，覆盖住样品即可。如果是悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。

3.室温孵育5~10分钟。

4.吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2~3次， 3~5分钟/每次，洗掉未结合的DAPI。

5.在荧光显微镜下用360 nm激发波长，460 nm发射波长的滤光片观察细胞。

保存条件

2~8°C避光保存，有效期12个月。

注意事项

1.荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

2.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

3.使用过程中请穿实验服并戴一次性手套防护。