Human IP-10/CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit
人10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP-10/CXCL10)酶联免疫吸附测定试剂盒
规格: | / 96T / 48T / 96T*5 |
价格: | / ¥2600 / ¥1800 / ¥11050 |
货号:E-EL-H0050
反应性: 人
检测范围: 7.81~500 pg/mL
灵敏度: 4.69 pg/mL
用途
该试剂盒用于体外定量检测人serum, plasma and other biological fluids中IP-10/CXCL10浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IP-10/CXCL10抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人IP-10/CXCL10会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IP-10/CXCL10抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人IP-10/CXCL10抗体与结合在包被抗体上的人IP-10/CXCL10结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IP-10/CXCL10浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IP-10/CXCL10的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | 人 |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 7.81—500 pg/mL |
灵敏度 | 4.69 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | serum, plasma and other biological fluids |
特异性
可检测样本中的人IP-10/CXCL10,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
500 | 2.549 2.559 |
2.554 | 2.468 |
250 | 1.668 1.692 |
1.68 | 1.594 |
125 | 0.979 0.940 |
0.961 | 0.875 |
62.5 | 0.533 0.545 |
0.539 | 0.453 |
31.25 | 0.306 0.306 |
0.306 | 0.22 |
15.63 | 0.191 0.189 |
0.19 | 0.104 |
7.81 | 0.135 0.143 |
0.139 | 0.053 |
0 | 0.078 0.094 |
0.085 | -- |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
26.50 | 78.80 | 207.70 | 25.50 | 80.20 | 211.70 |
Standard
deviation |
1.50 | 4.60 | 11.40 | 1.70 | 4.40 | 11.00 |
C V (%) | 5.66 | 5.84 | 5.49 | 6.67 | 5.49 | 5.20 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=5) | 96-109 | 102 |
EDTA plasma (n=5) | 93-111 | 101 |
Cell culture media (n=5) | 85-99 | 91 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-100 | 99-114 | 90-103 |
Average (%) | 92 | 104 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 92-107 | 86-101 | 97-110 |
Average (%) | 100 | 93 | 103 | |
1:8 | Range (%) | 96-108 | 86-100 | 97-112 |
Average (%) | 103 | 93 | 104 | |
1:16 | Range (%) | 94-111 | 87-100 | 92-103 |
Average (%) | 101 | 92 | 98 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 4℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 4℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 4℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
- 4. 吸水纸
操作步骤
|
1.对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
2.弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 | |
3.弃掉板内液体,洗板3次 | |
4.每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 | |
5.每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟 | |
6.每孔加入50μL终止液 | |
7.立即在450nm波长下读数,处理数据 |
客户发表文献
- 文献: A SCID mouse-human lung xenograft model of SARS-CoV-2 infection
样品类型: Tissue homogenate - 文献: Pathogenic Roles of CXCL10 in Experimental Autoimmune Prostatitis by Modulating Macrophage Chemotaxis and Cytokine Secretion
样品类型: serum - 文献: Inflammation-Driven Secretion Potential Is Upregulated in Osteoarthritic Fibroblast-Like Synoviocytes
样品类型: Human fibroblast-like synoviocytes (HFLS) cells - 文献: Activation of the STING-IRF3 pathway involved in psoriasis with diabetes mellitus
样品类型: HaCaT cell - 文献: Diosmectite inhibits the interaction between SARS-CoV-2 and human enterocytes by trapping viral particles, thereby preventing NF-kappaB activation and CXCL10 secretion
样品类型: Caco-2 cells - 文献: Leptin correlates with monocytes activation and severe condition in COVID-19 patients
样品类型: Serum - 文献: Exploring alternative cytokines as potential biomarkers for latent tuberculosis infection in pregnant women
样品类型: plasma