Human PTX 3/TSG-14(Pentraxin 3) ELISA Kit
人正五聚蛋白3(PTX3/TSG-14)酶联免疫吸附测定试剂盒
规格: | / 96T / 48T / 96T*5 |
价格: | / ¥2600 / ¥1800 / ¥11050 |
货号:E-EL-H6081
反应性: 人
检测范围: 6.86~5000 pg/mL
灵敏度: 4.12 pg/mL
用途
该试剂盒用于体外定量检测人serum, plasma and other biological fluids中PTX3/TSG-14浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人PTX3/TSG-14抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人PTX3/TSG-14会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人PTX3/TSG-14抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人PTX3/TSG-14抗体与结合在包被抗体上的人PTX3/TSG-14结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,PTX3/TSG-14浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中PTX3/TSG-14的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | 人 |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 6.86—5000 pg/mL |
灵敏度 | 4.12 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | serum, plasma and other biological fluids |
特异性
可检测样本中的人PTX3/TSG-14,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
5000 | 2.622 2.666 |
2.644 | 2.565 |
1666.67 | 1.684 1.684 |
1.684 | 1.605 |
555.5599999999999 | 1.083 1.045 |
1.064 | 0.985 |
185.19 | 0.539 0.575 |
0.557 | 0.478 |
61.73 | 0.335 0.325 |
0.33 | 0.251 |
20.58 | 0.214 0.192 |
0.203 | 0.124 |
6.86 | 0.143 0.157 |
0.15 | 0.070 |
0 | 0.073 0.085 |
0.079 | -- |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
230.55 | 565.35 | 2010.46 | 209.00 | 617.46 | 1987.07 |
Standard
deviation |
13.63 | 24.99 | 96.70 | 13.63 | 29.64 | 104.52 |
C V (%) | 5.91 | 4.42 | 4.81 | 6.52 | 4.80 | 5.26 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=5) | 86-102 | 93 |
EDTA plasma (n=5) | 90-104 | 96 |
Cell culture media (n=5) | 86-102 | 93 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 93-105 | 95-107 | 92-108 |
Average (%) | 99 | 101 | 99 | |
1:4 | Range (%) | 91-105 | 94-108 | 93-104 |
Average (%) | 98 | 99 | 98 | |
1:8 | Range (%) | 96-109 | 94-110 | 90-106 |
Average (%) | 102 | 101 | 97 | |
1:16 | Range (%) | 94-105 | 95-107 | 88-102 |
Average (%) | 100 | 101 | 94 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 4℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 4℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 4℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
- 4. 吸水纸
操作步骤
|
1.对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
2.弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 | |
3.弃掉板内液体,洗板3次 | |
4.每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 | |
5.每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟 | |
6.每孔加入50μL终止液 | |
7.立即在450nm波长下读数,处理数据 |
客户发表文献
- 文献: Pentraxin 3 regulated by miR-224-5p modulates macrophage reprogramming and exacerbates osteoarthritis associated synovitis by targeting CD32
样品类型: serum,synovial fluid - 文献: Potential Therapeutic Activity of Berberine in Thyroid-Associated Ophthalmopathy: Inhibitory Effects on Tissue Remodeling in Orbital Fibroblasts
样品类型: Orbital fibroblasts (OFs) - 文献: Evaluation of the relationship between pentraxin 3 (PTX3) rs2305619 (281A/G) and rs1840680 (1449A/G) polymorphisms and the clinical course of COVID-19
样品类型: blood - 文献: Determination of pentraxin 3 levels in diagnosis of appendicitis in children
样品类型: serum - 文献: Serum pentraxin‐3 levels and flow‐mediated dilation in dipper and non‐dipper hypertension
样品类型: Serum