Matrix Metalloproteinase 3 (MMP-3) Inhibitor Screening Kit

基质金属蛋白酶3 (MMP-3)是MMP家族的重要成员之一。MMP-3前体被纤溶酶(plasmin)、胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin)等丝氨酸蛋白水解酶(serine protease)剪切去除包含半胱氨酸开关的前体肽，激活形成具有蛋白酶活性的MMP-3。MMP-3能够降解或剪切多种细胞外基质成分、前体蛋白或前体酶等，能破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障、释放E-钙粘蛋白(E-cadherin)、促进肿瘤侵袭转移、促进炎症反应，在肿瘤等的研究中日益受到重视。此外，MMP-3还参与组织形态发生、损伤修复、炎症反应等一系列生理、病理过程，在风湿性关节炎、动脉粥样硬化等疾病发生发展过程中发挥重要作用。 本MMP-3抑制剂筛选试剂盒采用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)的方法检测。MCA和Dnp被连接到MMP-3酶的天然底物上的两端，当MMP-3蛋白酶没有切割该底物时，两个基团足够接近，发生荧光共振能量转移，即Dnp可淬灭MCA的荧光而导致检测不到荧光；当该底物被MMP-3蛋白酶切割后，多肽的首尾两端分离，两个基团分开，MCA的荧光不再被Dnp淬灭，即可检测到MCA的荧光，这样通过荧光检测就可以非常灵敏地检测MMP-3蛋白酶的酶活性。 如果在反应体系中加入MMP-3蛋白酶的抑制剂(Inhibitor)，荧光的生成会被抑制，荧光强度与抑制剂的抑制效果成反比，这样就可以检测出MMP-3蛋白酶抑制剂的抑制效果。 MCA的最大激发波长为325nm，最大发射波长为393nm 。