ST/5-HT(Serotonin/5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit

产品货号:E-EL-0033c

规格: / 96T / 48T
价格: / ¥2400 / ¥1650

货号:E-EL-0033c

货期:3个工作日+顺丰周期

反应性: 通用

检测范围: 15.63~1000 ng/mL

灵敏度: 9.38 ng/mL

  • 详情
  • 文献(6)
  • 用途

    该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组ST/5-HT浓度。

    检测原理

    本试剂盒采用竞争ELISA法。用ST/5-HT抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的ST/5-HT与包被的ST/5-HT竞争生物素标记的抗ST/5-HT单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ST/5-HT浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中ST/5-HT的浓度。

    反应类型 竞争法
    规格 96T
    反应时间 2.0h
    反应性 通用
    检测方法 Colormetric
    检测范围 15.63-1000 ng/mL
    灵敏度 9.38 ng/mL
    样本体积 50μL
    样本类型 血清、血浆或其他相关生物液体

    特异性

    可检测样本中的ST/5-HT,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

    重复性

    板内,板间变异系数均<10%。

    典型数据

    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    (ng/mL) O.D Average
    1000 0.402
    0.426
    0.414
    500 0.528
    0.532
    0.53
    250 0.73
    0.722
    0.726
    125 1.004
    1.018
    1.011
    62.5 1.355
    1.343
    1.349
    31.25 1.674
    1.654
    1.664
    15.63 1.899
    1.901
    1.9
    0 2.217
    2.221
    2.219

    精密度

    板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
    板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

    Intra-assay Precision Inter-assay Precision
    Sample 1 2 3 1 2 3
    n 20 20 20 20 20 20
    Mean
    (ng/mL)
    51.20 141.30 362.70 54.70 132.00 351.00
    Standard
    deviation
    3.50 5.90 15.60 3.10 6.50 16.10
    C V (%) 6.84 4.18 4.30 5.67 4.92 4.59

    回收率

    分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

    Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
    Serum (n=5) 95-107 100
    EDTA plasma (n=5) 86-99 92
    Cell culture media (n=5) 91-105 98

    线性

    分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
    1:2 Range (%) 86-99 97-112
    Average (%) 97 92 104
    1:4 Range (%) 83-96 92-103 96-108
    Average (%) 90 98 102
    1:8 Range (%) 84-97 86-99 93-108
    Average (%) 90 92 101
    1:16 Range (%) 84-97 94-107 94-109
    Average (%) 90 99 100

    试剂盒组成及保存

    未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

    中文名称 英文名称 规格 保存条件
    ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
    冻干标准品 Reference Standard 2支
    浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
    浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
    标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
    生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
    酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
    浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
    底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
    反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
    封板覆膜 Plate Sealer 5 张
    产品说明书 Product Description 1 份
    质检报告 Certificate of Analysis 1 份

    说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
    试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

    试验所需自备物品

    • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
    • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
    • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
    • 4.吸水纸

    操作步骤

    1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育90分钟
    2. 弃掉板内液体,洗板3次
    3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次
    4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟
    5. 每孔加入50μL终止液
    6. 立即在450nm波长下读数,处理数据

    客户发表文献

    1. 文献: Pu Z H , Peng C , Xie X F , et al. Alkaloids from the rhizomes of Ligusticum striatum exert antimigraine effects through regulating 5-HT1B receptor and c-Jun[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2019, 237: 39-46.
      样品类型: Tissue homogenate
    2. 文献: Jiang S H, Li J, Dong F Y, et al. Increased Serotonin Signaling Contributes To The Warburg Effect In Pancreatic Tumor Cells Under Metabolic Stress And Promotes Growth Of Pancreatic Tumors In Mice[J]. Gastroenterology, 2017, 153: 277-291.
      样品类型: Cell culture supernatant,Tissue homogenate,Plasma
    3. 文献: Hussein A M, Abbas K M, Abulseoud O A, et al. Effects Of Ferulic Acid On Oxidative Stress, Heat Shock Protein 70, Connexin 43, And Monoamines In The Hippocampus Of Pentylenetetrazole-Kindled Rats[J]. Canadian Journal of Physiology And Pharmacology, 2017.
      样品类型: Tissue homogenate
    4. 文献: Zhang J X, Li S R, Yao S, et al. Anticonvulsant And Sedative-Hypnotic Activity Screening Of Pearl And Nacre (Mother Of Pearl)[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2016, 181: 229-235.
      样品类型: Tissue homogenate
    5. 文献: Bi Q R, Hou J J, Qi P, et al. Venenum Bufonis Induces Rat Neuroinflammation By Activiating NF-κB Pathway And Attenuation Of BDNF[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2016, 186: 103-110.
      样品类型: Tissue homogenate
    6. 文献: zgür B G, Aksu H, Birinciolu M, et al. Antidepressant-Like Effects Of The Xanthine Oxidase Enzyme Inhibitor Allopurinol In Rats. A Comparison With Fluoxetine[J]. Pharmacology Biochemistry and Behavior, 2015, 138: 91-95.
      样品类型: Plasma
    如有任何问题,请拨打电话 027-87879180 或填写 在线留言 我们会第一时间联系您。